Leagene 核酸提取辅助试剂(1:1替代试剂,pH>7.8),又称核酸抽提溶液或DNA抽提溶液(1:1),由Tris饱和酚和氯仿替代物组成,不含异戊醇,是传统苯酚-氯仿溶液(1:1)的优秀替代品,作用等同于苯酚-氯仿溶液(25:24)。该抽提液pH高于7.8,可以保证分相后DNA存在于上层水相中,用于样品中基因组DNA的提取。
在酚-氯仿中加入少量异戊醇,可以减少抽提过程中泡沫的产生,同时异戊醇有助于分相,使离心后的上层水相,中层变性蛋白相以及下层有机溶剂相维持稳定。由于本产品不含异戊醇,根据需要自行添加,一般为核酸提取辅助试剂(1:1替代试剂):异戊醇=49:1或99:1。
DNA抽提溶液提取DNA的原理是通过DNA裂解缓冲液裂解样品后释放出DNA,再通过DNA抽提溶液(25:24:1)抽提,去除样品中蛋白、多糖、酚类等杂质,再加入乙醇或异丙醇等沉淀核酸即可使DNA分离出来。该抽提溶液可以使蛋白质变性,同时利用RNA、DNA、蛋白质三者的性质差别来分离DNA。抽提离心后的上层为含DNA的水相,中间为变性蛋白相,下层为有机溶剂相。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。